GPC凝胶渗透色谱检测测试

 产品介绍

当聚合物溶液流经色谱柱（凝胶颗粒）时，较大的分子（体积大于凝胶孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多；经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。溶质的淋出体积与其分子量有关，分子量愈大，其淋出体积愈小。

a. 常温流动相: 水相、THF、DMF、DMSO、、六氟异丙醇、a-氯奈；

b. 高温流动相：DMF（80℃），三氯苯；

c. 可以测相对分子量的流动相：水相、THF、DMF、DMSO、六氟异丙醇、a-氯奈、三氯苯

d .可以测绝对分子量的流动相：水相、THF、DMF、三氯苯

不同流动相对应的分子量范围：DMF：3000-100万；THF：500-200万；水相：300-50万；相：500-200万。分子量接近限值的，测试不太准确，低于下限会跟溶剂峰连在一起测不准。

测试要求

1．样品量：可为液体、粉末、块状样品，粉末样品10mg，液体5-10ml；

2．要求在指定流动相中有较好的溶解性，送样前需要自行确认好样品在指定流动相中的溶解性，难溶样品自行溶好再送样, 溶解后的样品要透明均一，过滤头不堵；如果样品溶解性较差，要求提前溶解好（浓度要求在2-5mg /ml左右），或者提供合理溶解方法（如果由实验室溶解，费用问题请提前咨询）

3．样品溶好之后，有机相样品需要过0.45 μm滤膜，水相样品需要过0.22 μm滤膜，样品浓度一般控制在2-5 mg/mL；样品溶好过滤膜后，可能会损失部分样品信息，建议送粉末；

4．高温相要保证在该测试温度下样品不分解；并样品不能含F，含F会分解污染柱子

常见问题
1. 为什么样品要求在指定流动相中溶解性要好？

因为GPC（凝胶渗透色谱）本质上是一个色谱测试，是通过色谱柱分离不同分子量的成分，溶解性不好的话是需要过滤后测试的，不溶成分的分子量就无法测试，而且如果样品溶解度差的话，样品有可能会在色谱柱析出，毁坏柱子
2. 为什么测试结果跟预期分子量差别较大？

第一，gpc的测试原理是每种流动相都有对应的一种标准物质作出的标准曲线，样品测试结果要跟标曲比较，然后得出测试结果，所以大多数流动相得到的结果是样品的相对分子量，如果样品跟标准品差别太大的话，测试结果就有可能跟真实值相差较大；第二，GPC一般测试样品都是聚合物，预期分子量只是基于实验设计的一个预期值，所以有时候跟实际情况有出入也是正常的。
3. 相对分子量和绝对分子量的区别？

第一，测试原理不同：相对分子量时通过建立标准物质的标准曲线，待测样品与之相比得到分子量分布；绝对分子量是通过三联检测器，主要是激光检测器在样品颗粒表面散射角度不同通过数学模型计算分子量分布；第二，检测器不同：相对分子量主要是折光示差检测器，绝对分子量需要示差、粘度、光散射三联检测器；第三，检测分子量范围不同：相对分子量可以检测较小分子量，而一般分子量在几万以上才适合绝对分子量