Mitomycin C

  Mitomycin C是一种抗肿瘤药物和抗生素，可有效的抑制DNA合成 (DNA synthesis)。Mitomycin C 是一种 DNA 交联剂，诱导 DNA 损伤。

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  丝裂霉素C的生物活性

  体外

  HCT116（p53 -/-）细胞对丝裂霉素C或单独的TRAIL的敏感性最。然而，令人惊讶的是，MMC和TRAIL的联合治疗显着降低了细胞活力。尽管丝裂霉素C和TRAIL单独有效，但丝裂霉素C实质上增强了TRAIL对细胞增殖的抑制作用。丝裂霉素C和TRAIL单独治疗分别诱导9.5％和35.0％的细胞凋亡。然而，丝裂霉素C和TRAIL的联合治疗使细胞凋亡增加至66.6％。丝裂霉素C是一种细胞毒性化学治疗剂，会以DNA交联形式以及多种DNA单加合物形式引起DNA损伤，并已知可诱导p53 。

  体内

  每隔一天用丝裂霉素C（ip，1 mg / kg）和TRAIL（iv，100μg）治疗携带异种移植HCT116（p53 -/-）结肠肿瘤和HT-29结肠肿瘤的小鼠。用组合治疗方案的10个连续周期治疗动物。联合疗法可显着抑制肿瘤生长，并且不会影响小鼠的体重，这表明丝裂霉素C和TRAIL的治疗组合耐受性良好，并在体内具有抗肿瘤活性[1]。膀胱丝裂霉素C滴注对体重有影响。每周连续3次滴注1 mg / mL丝裂霉素C后，体重几乎没有增加，而与MMC处理的大鼠相比，其他3组中的老鼠的体重增加具有统计学意义。

  丝裂霉素C实验参考方法

  细胞分析

  使用结肠腺癌HCT116和HT-29人结肠癌细胞。CellTiter-Glo发光细胞生存力测定法用于测量细胞生存力，该方法使用独特，稳定的荧光素酶形式来测量ATP，作为活细胞的指示剂，产生的发光信号与培养物中存在的活细胞数量成正比。细胞用丝裂霉素C（5μM）预处理12 h或24 h，然后暴露于不同浓度的TRAIL 12 h。加入等体积（100μL）的CellTiter-Glo TM试剂，将溶液在定轨振荡器上轻轻混合2分钟。将混合物在室温下孵育10分钟以使发光信号稳定，然后使用Xenogen IVIS系统进行成像以量化细胞活力.

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

  动物管理

  小鼠

  通过丝裂霉素C（1 mg / kg）腹膜内注射24h，然后静脉注射一剂纯化的rhTRAIL（100μg），对4至6周龄的NCr裸鼠进行治疗。作为阴性对照，以相同的治疗频率向一部分小鼠注射（ip和iv）生理盐水（媒介物）。将动物连续治疗3周。每周使用卡尺测量肿瘤体积来监测肿瘤大小。

  大鼠

  将中位体重为217 g（范围为187至255）的13周龄成年雌性Wistar幼鼠随机分为4组，每组10只，即不滴注的正常组，0.9％的NaCl或安慰剂组接受化疗药物丝裂霉素C（1 mg / mL）组滴注的药物。

  MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。